Nie wiem, czy często musisz kupować materiały eksploatacyjne. Jeśli często kupujesz laboratoryjne materiały eksploatacyjne, może się okazać, że różni producenci mogą oznaczać swoje produkty jako wolne od enzymów, pirogenów i endotoksyn, zwłaszcza w przypadku materiałów eksploatacyjnych związanych z biologią komórki i biologią analityczną, takich jak zwykłe probówki wirówkowe o pojemności 15 ml i 50 ml, butelki do hodowli komórkowych, naczynia do hodowli komórkowych, płytki do hodowli komórkowych, probówki do kriokonserwacji, tablica do PCR i inne produkty. Produkty z tymi opisami mogą być również droższe niż zwykłe podobne produkty. Jakie jest zatem znaczenie tych stwierdzeń i jak wpływają one na nasze eksperymenty? Jak powinniśmy dokonywać wyborów podczas zakupów? Oto krótkie wprowadzenie.
Definicja
1.Pirogen
Pirogen odnosi się do substancji pirogennej, która może powodować nieprawidłowy wzrost temperatury ciała po wstrzyknięciu do organizmu. W szerokim znaczeniu pirogen obejmuje pirogen bakteryjny, endogenny pirogen makrocząsteczkowy, endogenny pirogen niskocząsteczkowy i pirogen chemiczny. „Pirogen” odnosi się tutaj głównie do pirogenu bakteryjnego, który jest metabolitem niektórych mikroorganizmów, zwłok bakteryjnych i endotoksyny.
2. Enzym
Enzymy uczono w gimnazjum. Jako katalizator biologiczny, enzymy mogą skutecznie katalizować różne reakcje biochemiczne w naszych organizmach. Jednak, gdy większość produktów mówi brak enzymu, a właściwie dokładniej, nie mają na myśli wszystkich enzymów, ale nukleazy. Wielu producentów pisze również, że nie zawiera DNaz i nie zawiera RNaz. Nukleaza może rozkładać cząsteczki kwasu nukleinowego. Może specyficznie degradować DNA lub RNA, a także może działać na cząsteczki DNA i RNA z niską specyficznością.
3.Endotoksyna
Endotoksyna to ogólne określenie substancji toksycznych występujących w bakteriach Gram-ujemnych. Jest składnikiem ściany komórkowej różnych bakterii Gram-ujemnych. Jest to toksyna uwalniana po pęknięciu komórki, a składnikiem jest lipopolisacharyd. Powszechnie uważa się, że endotoksyna jest pirogenem. Jest to ogólnie akceptowalne podczas produkcji leków: jeśli nie ma endotoksyny, nie ma pirogenu. Dlatego podczas produkcji można wykonać tylko test endotoksyny bez testu pirogennego.
Wpływ
Pirogen i endotoksyny mogą stymulować organizm i powodować gorączkę. W farmacji, klinice i innych dziedzinach, w trosce o bezpieczeństwo ludzi, zwykle istnieją wymagania dotyczące ilości pirogenów i endotoksyn. W Farmakopei Chińskiej podano konkretne metody wykrywania pirogenów i endotoksyn. Jeśli chodzi o laboratoria molekularne, nukleaza może degradować docelowe fragmenty molekularne, ponieważ może rozkładać DNA. Na przykład w eksperymentach PCR, jeśli nukleaza jest zanieczyszczona, może nie być wartości CT, co skutkuje fałszywie dodatnimi wynikami. Dlatego materiały eksploatacyjne, takie jak przyssawka i PCR, są zwykle wolne od nukleaz.
Wykrywanie pirogenów i endotoksyn
Poniżej znajduje się krótkie wprowadzenie do testów na pirogen i endotoksyny w farmakopei.
1. Testowanie pirogenów
Królicza metoda wykrywania pirogenów jest opisana w Ogólnych zasadach Chińskiej Farmakopei 1142. Wykorzystać zdrowe i kwalifikowane króliki, wstrzyknąć królikom dożylnie pewną ilość badanej substancji i obserwować wzrost temperatury królików w określonym czasie. Przybory do badań mające kontakt z badanym przedmiotem muszą być sterylne i wolne od pirogenów. Pirogen jest zwykle usuwany przez sterylizację suchym ciepłem (250 stopni, ponad 30 minut) lub innymi odpowiednimi metodami. Jeżeli temperatura badanego królika wzrośnie do określonej normy w określonym czasie, uważa się, że test na pirogenność badanego wyrobu nie spełnia wymagań.
2. Test endotoksyny
Przed testem endotoksyn test limulus był używany na całym świecie. Specyficzne metody obejmują metodę żelową i metodę fotometryczną. Odczynnik Limulus może aglutynować z endotoksyną bakteryjną, tworząc żel lub zmianę zmętnienia, a zawartość endotoksyn można określić, mierząc tę zmianę. Lizat amebocytów Tachypleus jest rodzajem odczynnika ekstrahowanego z krwi stawonogów morskich Tachypleus lizat amebocytów. Dlatego lizat amebocytów Tachypleus został złapany i zabity w dużych ilościach na całym świecie, a także stał się narodowym zwierzęciem chronionym drugiej kategorii w Chinach. Obecnie FDA zatwierdziła metodę rekombinacji czynnika C w celu zastąpienia odczynnika TAL. Prawo to zostało również wspomniane w wytycznych Farmakopei Chińskiej.
Jak wybrać
W rzeczywistości wybór nie jest trudny po zrozumieniu tych pojęć. Opiera się głównie na własnych potrzebach. Ogólnie rzecz biorąc, materiały eksploatacyjne bez enzymów i pirogenów są powszechne, a produkty bez endotoksyn są stosunkowo nieliczne. Jeśli sam eksperyment nie ma wobec nich wysokich wymagań, można użyć zwykłych materiałów eksploatacyjnych. Na przykład podczas wirowania komórek lub powiązanych składników lepiej jest używać probówki wirówkowej bez enzymów i pirogenów, podczas gdy zwykłe probówki wirówkowe mogą być faktycznie używane do zwykłego wirowania cieczy.
Ponadto jest to również problem, który będzie miał wielu użytkowników. Kupując probówki wirówkowe od niektórych firm, pytają, czy można je ponownie wykorzystać. W rzeczywistości problem ten zostanie omówiony w zależności od sytuacji, ponieważ probówki wirówkowe zostały do pewnego stopnia zanieczyszczone po jednorazowym użyciu, a nawet sterylizacja parą ciśnieniową nie może całkowicie wyeliminować zanieczyszczenia, dlatego jeśli użyjesz go ponownie, zależy od własnych potrzeb użytkownika do eksperymentu.
W ostatecznym rozrachunku wszystkie produkty są dla eksperymentatorów i eksperymentów. Nie możemy wpływać na nasze eksperymenty ze względu na produkty, ale musimy wybrać odpowiednie produkty zgodnie z naszymi eksperymentami.
Probówka do wirowania BKMAM bez pirogenów, bez rybozymu, bez endotoksyn, 0. 5 ml, 1,5 ml, 2 ml, 5 ml, 10 ml, 15 ml, 50 ml do wyboru.
Wolna od pirogenów, wolna od rybozymu, wolna od endotoksyn probówka Cryovials, gwint wewnętrzny, gwint zewnętrzny, z 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml do wyboru.
Zapraszamy do składania zamówień u nas!